挑戦し続けることの大事さを真っ向から教えてくれる、「週刊少年ジャンプ」の漫画をアニメ化。悪辣だけど天才的な頭脳を持つ蛭魔役に、田村淳が起用されたことも話題に。
小早川セナは、気弱な高校1年生。入学早々、パシリで鍛えた俊足を見込まれたセナは、卑劣で悪魔のような男・蛭魔妖一にアメフト部に入部させられてしまう。しかもいきなり、光速のランニングバック、アイシールド21に仕立て上げられてしまい…。
気弱で引っ込み思案な小早川瀬那は、パシリ人生を送ってきた。高校入学を機にそんな自分を変えようと、アメフト部に主務として入部しようとするが、そんなセナのパシリで鍛えたスピードに蛭魔妖一が着目し…。
22分主務として入部したはずのセナは、蛭魔に謎のランニングバック・アイシールド21に仕立て上げられた。実は、翌日からの大会に出場するためには、11人を集めなければならなかった。セナは懸命に走り出し…。
22分助っ人を集めて、大会初戦を迎える泥門デビルバッツ。主務・セナが見守る試合は、両チーム無得点のまま終盤へと差し掛かるが、とうとう先制されてしまう。残り9秒、ついにアイシールド21が登場する。
22分まもりは蛭魔のいるアメフト部に、セナを置いておくわけにはいかないと息巻く。そんなまもりを見たセナは、彼女に守られていた幼少時代を思い出す。そして、自分を変えようと、セナはまもりに自分の意志を告げる。
22分王城ホワイトナイツ戦が始まり、セナは強豪との対戦に怯えてしまう。そんなセナに対して栗田は「みんなを盾だと思って」と声を掛ける。みんなを信じて走り出したセナは、次々に王城ディフェンスを抜いていった。
22分王城に攻撃権が移り、エースの桜庭が登場。一方泥門は、アイシールド21のインターセプトにかけたフォーメーションをとり、セナが桜庭へのパスカットを試みる。そして、王城の守護神・進清十郎が登場する。
22分進との実力の差を見せ付けられたセナは、試合から逃げ出そうとする。だが、仲間たちの姿を見て再び試合へと戻った。残り5分で50点差。諦めている蛭魔にセナは「もう少しで進を抜けるかもしれない」と訴える。
22分セナは「進に勝ちたい」という気持ちを抱き始めた。何度もそのタックルに倒されるが、諦めずに向かっていく。だが、ついにラストワンプレーを迎えた。進に勝つには、光速の世界に達する必要があった。
22分秋大会へ向けて泥門デビルバッツが始動する。蛭魔のパスを受けるレシーバーが必要だと聞いたセナは、野球部のモン太に会い、勧誘する。ところが彼は、自分は野球でキャッチのヒーローになりたいと主張した。
22分王城戦でけがを負わせてしまった桜庭が入院していることを知ったセナは、モン太と見舞いに出向く。不安を抱きつつ桜庭と対面するセナだが、実力以上にエース扱いされてしまっている彼の意外な苦悩を知る。
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