女子を中心に刀剣ブームを巻き起こした大人気ゲームを、ほのぼの日常アニメに定評のある動画工房が映像化。神風動画が手掛けるという週替わりのEDにも注目！
西暦2205年、歴史改変を目論む「歴史修正主義者」から歴史を守るため「審神者」によって励起させられた刀剣男士たち。17振目の刀剣男士としてとある本丸に顕現した大和守安定は、同じくかつて沖田総司の刀であった加州清光に再会する…。
17振りめの刀剣男士としてとある本丸に現れた大和守安定。本丸に来て初めての朝、彼は元の主が同じ新撰組の沖田総司である加州清光と共に本丸を散歩する。やがて、刀剣男士たちに時の政府から連絡が入り…。
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同田貫正国と鶴丸国永が顕現した。大和守安定と加州清光は2振りを連れて本丸の中を案内することに。一方、へし切長谷部、宗三左文字、薬研藤四郎の3振りを含む刀剣男士たちに本能寺への出陣命令が下される。
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大樹の下で幸運の四葉を見つけた平野藤四郎は、新たにやって来た鶯丸に届けに行こうとするが、途中で邪魔が入ってしまう。同じ頃、大樹の下では粟田口派の短刀たちがまだ顕現していない兄に思いをはせていた。
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和泉守兼定が顕現した。元の主が同じ新撰組・土方歳三の堀川国広は喜び、すぐに本丸案内を買って出る。大和守安定と加州清光も和泉守兼定との再会を喜び、新撰組の思い出話に花を咲かせていたが…。
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燭台切光忠と鶴丸国永は、顕現したばかりの大倶利伽羅がこの本丸で馴染めるのか心配していた。歌仙兼定や鶯丸たちの行動を見た燭台切光忠は、あることを思い付く。一方、鍛刀部屋では太刀・三日月宗近が顕現し…。
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大和守安定と加州清光は、本丸に来て間もない山伏国広、御手杵、博多藤四郎らと江戸遠征を控えていたが、遠征直前に主が発熱してしまう。彼らは調査に加えて解熱効果のある薬草を採取すべく、江戸の山中へ向かう。
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陸奥守吉行の発案で海水浴へ行くことになり、希望した刀剣男士総勢17振りは初めての海を楽しむ。本丸に江雪左文字が来たことで、小夜左文字も喜んでいる様子。そんな微笑ましい風景を見た薬研藤四郎は…。
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蜻蛉切と日本号が本丸に来て、ついに三名槍が揃った。日本号は縁側にやって来た青い鳥をどうしても捕まえたくなり、三名槍は協力して鳥を追う。その夜、秋田藤四郎がお化けを見たと怯えていて…。
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鳴狐は小狐丸と三日月宗近に手料理を振る舞い、楽しませる。それを見た獅子王は「老齢の扱いでは負けられない」と、三日月宗近を楽しませる作戦を考えるのだった。一方その頃、阿津賀志山に出陣命令が出る。
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愛染国俊と蛍丸は、やる気なく振る舞う明石国行が本丸でうまくやっていけるか不安で仕方がない。そんな中、本丸で妙なことが連続して起こり、明石国行に疑いの目が向けられる。一方、小狐丸たちは江戸へ出陣し…。
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